顶分型，顶底分型战法

经典活化 (M1) 和替代性活化 (M2) 巨噬细胞表现出不同的表型和功能，尽管我们前些时间编译了一篇2014年的旧文《 巨噬细胞活化的 M1 和 M2 模式：到了需重新评估的时候了 [1] 》，但一方面这篇文章偏旧，另一方面，M1和M2区分的热度在科研工作中的热度仍然没有下降，所以大家在科研中，仍然有很大的需求要把这两类巨噬细胞分开。这个现象从流式中文网上关于「巨噬」的帖子（包括提问和分享）共115个可见一斑。

在第一版的《 Guidelines for the use of flow cytometry and cell sorting in immunological studies [2] 》中，曾为大家总结了人和小鼠巨噬细胞的表型特征，大家可以据此根据自己的研究需求选择：

但大家可能还是有点迷糊，不知道实际应该如何应用，没事，以人巨噬细胞为例，可参考《 Regulation of Human Macrophage M1–M2 Polarization Balance by Hypoxia and the Triggering Receptor Expressed on Myeloid Cells-1 [3] 》吧，里面有幅图简单明了的告诉大家如何设门，就是FSC/SSC、CD68依次圈出巨噬细胞之后，根据CD80和CD206，分出CD80+CD206-的M1和CD80+CD206+的M2，这个分析步骤，感觉是目前看到最简单的区分人巨噬细胞M1和M2的方法了：

小鼠巨噬，也可以参考此方法，也可以加上F4/80、CD11b作为上级门，也可以加上巨噬细胞功能标记，可参考 mTORC1-mediated polarization of M1 macrophages and their accumulation in the liver correlate with immunopathology in fatal ehrlichiosis [4] 。

但是，有不少FLOWER仍然反映，CD206实在染不好啊，分不开，那怎么办呢？Plos One上面有篇2015年的文章《 Novel Markers to Delineate Murine M1 and M2 Macrophages - PubMed [5] 》，比对了野生型C57BL/6J小鼠M0、M1、M2巨噬细胞转录产物的差异（上调、下调），再经过验证，发现在流式上，CD38/Egr2可很好的区分M1和M2，见下图，当然 CD38/iNOS也是非常好的区分标记。虽然是7年前，但是也被引用了356次，大家可以借鉴一下。

这样整理下来，你们清楚如何做巨噬细胞分型了吗？可到流式中文网论坛上继续与其它站友交流讨论。

References

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